Η χρωματογραφία, γνωστή και ως «χρωματογραφική ανάλυση», «χρωματογραφία», είναι μια μέθοδος διαχωρισμού και ανάλυσης, η οποία έχει ένα πολύ ευρύ φάσμα εφαρμογών στην αναλυτική χημεία, την οργανική χημεία, τη βιοχημεία και άλλους τομείς.
Ο ιδρυτής της χρωματογραφίας είναι ο Ρώσος βοτανολόγος M.Tsvetter.Το 1906, ο Ρώσος βοτανολόγος Zvetter δημοσίευσε τα αποτελέσματα του πειράματός του: Για να διαχωρίσει τις φυτικές χρωστικές, έριξε εκχύλισμα πετρελαϊκού αιθέρα που περιείχε φυτικές χρωστικές σε ένα γυάλινο σωλήνα που περιείχε σκόνη ανθρακικού ασβεστίου και τον έκλουσε με πετρελαϊκό αιθέρα από πάνω προς τα κάτω.Επειδή διαφορετικές χρωστικές έχουν διαφορετικές ικανότητες προσρόφησης στην επιφάνεια των σωματιδίων ανθρακικού ασβεστίου, με τη διαδικασία της έκπλυσης, διαφορετικές χρωστικές κινούνται προς τα κάτω με διαφορετικές ταχύτητες, σχηματίζοντας έτσι λωρίδες διαφορετικών χρωμάτων.Τα συστατικά της χρωστικής διαχωρίστηκαν.Ονόμασε αυτή τη μέθοδο διαχωρισμού χρωματογραφία.
Σχηματική αναπαράσταση ενός πειράματος διαχωρισμού χρωστικών φύλλων φυτών
Με τη συνεχή ανάπτυξη των μεθόδων διαχωρισμού, όλο και περισσότερες άχρωμες ουσίες γίνονται αντικείμενο διαχωρισμού, η χρωματογραφία έχασε επίσης σταδιακά την έννοια του "χρώμα", αλλά το όνομα εξακολουθεί να χρησιμοποιείται σήμερα.
Χρωματογραφική ταξινόμηση
Η ουσία της χρωματογραφίας είναι μια διαδικασία κατά την οποία τα μόρια που πρόκειται να διαχωριστούν κατανέμονται και εξισορροπούνται μεταξύ της στατικής φάσης και της κινητής φάσης.Διαφορετικές ουσίες κατανέμονται διαφορετικά μεταξύ των δύο φάσεων, γεγονός που τις κάνει να κινούνται με διαφορετικές ταχύτητες με την κινητή φάση.Με την κίνηση της κινητής φάσης, διαφορετικά συστατικά στο μείγμα διαχωρίζονται μεταξύ τους στη στατική φάση.Ανάλογα με τον μηχανισμό, μπορεί να χωριστεί σε διάφορες κατηγορίες.
1, σύμφωνα με την ταξινόμηση φυσικής κατάστασης δύο φάσεων
Κινητή φάση: Αέρια χρωματογραφία, υγρή χρωματογραφία, χρωματογραφία υπερκρίσιμου υγρού
Στατική φάση: αέριο-στερεό, αέριο-υγρό.Υγρό-στερεό, υγρό-υγρό
2, σύμφωνα με τη μορφή ταξινόμησης στατικής φάσης
Χρωματογραφία στήλης: χρωματογραφία συσκευασμένης στήλης, χρωματογραφία τριχοειδούς στήλης, μικροσυσκευασμένη χρωματογραφία στήλης, προπαρασκευαστική χρωματογραφία
Επίπεδη χρωματογραφία: χρωματογραφία χαρτιού, χρωματογραφία λεπτής στιβάδας, χρωματογραφία πολυμερούς μεμβράνης
3, ταξινομημένο σύμφωνα με τον μηχανισμό διαχωρισμού
Χρωματογραφία προσρόφησης: Τα διαφορετικά συστατικά διαχωρίζονται ανάλογα με τις ικανότητές τους προσρόφησης και εκρόφησης στα προσροφητικά
Χρωματογραφία κατανομής: Τα διάφορα συστατικά διαχωρίζονται ανάλογα με τη διαλυτότητά τους στο διαλύτη
Χρωματογραφία μοριακού αποκλεισμού: σύμφωνα με το μέγεθος του μοριακού μεγέθους του διαχωρισμού ln ιοντοανταλλακτική χρωματογραφία: διαφορετικά συστατικά της συγγένειας για τον διαχωρισμό ιοντοανταλλακτικής ρητίνης
Χρωματογραφία συγγένειας: Διαχωρισμός χρησιμοποιώντας την παρουσία ειδικής συγγένειας μεταξύ βιολογικών μακρομορίων
Τριχοειδής ηλεκτροφόρηση: τα εξαρτήματα διαχωρίστηκαν ανάλογα με τις διαφορές στην κινητικότητα και/ή στη συμπεριφορά διαχωρισμού
Η χειρόμορφη χρωματογραφία χρησιμοποιείται για τον διαχωρισμό και την ανάλυση χειρόμορφων φαρμάκων, τα οποία μπορούν να χωριστούν σε τρεις κατηγορίες: Μέθοδος αντιδραστηρίου χειρομορφικής παραγωγοποίησης.Χειρική μέθοδος πρόσθετης κινητής φάσης.Χηλική μέθοδος ανάλυσης στατικής φάσης
Βασική ορολογία για τη χρωματογραφία
Οι καμπύλες που λαμβάνονται με τη γραφική παράσταση των σημάτων απόκρισης των συστατικών μετά την ανίχνευση του χρωματογραφικού διαχωρισμού έναντι του χρόνου ονομάζονται χρωματογραφήματα.
Βασική γραμμή:Κάτω από ορισμένες χρωματογραφικές συνθήκες, η καμπύλη του σήματος που παράγεται όταν μόνο η κινητή φάση διέρχεται από το σύστημα ανιχνευτή ονομάζεται γραμμή βάσης, όπως φαίνεται στη γραμμή ot.Όταν η πειραματική συνθήκη ήταν σταθερή, η γραμμή βάσης ήταν μια γραμμή παράλληλη προς τον οριζόντιο άξονα.Η γραμμή βάσης αντανακλά τον θόρυβο του οργάνου, κυρίως του ανιχνευτή, με την πάροδο του χρόνου.
Ύψος κορυφής:την κατακόρυφη απόσταση μεταξύ του χρωματογραφικού σημείου κορυφής και της γραμμής βάσης, που συμβολίζεται με h, όπως φαίνεται στη γραμμή AB'.
Πλάτος περιοχής:Το πλάτος της περιοχής της χρωματογραφικής κορυφής σχετίζεται άμεσα με την απόδοση διαχωρισμού.Υπάρχουν τρεις μέθοδοι για την περιγραφή του χρωματογραφικού πλάτους κορυφής: τυπική απόκλιση σ, πλάτος κορυφής W και FWHM W1/2.
Τυπική απόκλιση (σ) :σ είναι η μισή απόσταση μεταξύ των δύο σημείων καμπής στην καμπύλη κανονικής κατανομής και η τιμή του σ δείχνει το βαθμό διασποράς των στοιχείων μακριά από τη στήλη.Όσο μεγαλύτερη είναι η τιμή του σ, τόσο πιο διασκορπισμένα είναι τα συστατικά των εκροών και τόσο χειρότερο είναι το αποτέλεσμα διαχωρισμού.Αντίθετα, τα συστατικά των εκροών είναι συγκεντρωμένα και το αποτέλεσμα διαχωρισμού είναι καλό.
Πλάτος κορυφής W:Τα σημεία τομής και στις δύο πλευρές της χρωματογραφικής κορυφής χρησιμοποιούνται ως εφαπτόμενες γραμμές και η τομή στη γραμμή βάσης ονομάζεται πλάτος κορυφής ή πλάτος γραμμής βάσης, το οποίο μπορεί επίσης να εκφραστεί ως W, όπως φαίνεται στο Σχήμα IJ.Σύμφωνα με την αρχή της κανονικής κατανομής, η σχέση μεταξύ του πλάτους κορυφής και της τυπικής απόκλισης μπορεί να αποδειχθεί ότι είναι W=4σ.
Ε1/2:Το πλάτος κορυφής στο μισό του ύψους κορυφής ονομάζεται FWHM, όπως φαίνεται για την απόσταση του GH.W1/2=2,355σ, W=1,699W1/2.
Τα W1/2, W προέρχονται και τα δύο από το σ και χρησιμοποιούνται για τον υπολογισμό των περιοχών κορυφής εκτός από τη μέτρηση του φαινομένου της στήλης.Η μέτρηση FWHM είναι πιο βολική και πιο συχνά χρησιμοποιούμενη.
σύντομη περίληψη
Από τη χρωματογραφική καμπύλη εκροής κορυφής, μπορούν να επιτευχθούν οι ακόλουθοι στόχοι:
α, Πραγματοποιήθηκε ποιοτική ανάλυση με βάση την τιμή κατακράτησης των χρωματογραφικών κορυφών
β, ποσοτική ανάλυση με βάση την περιοχή ή την κορυφή της χρωματογραφικής κορυφής
Γ. Η απόδοση διαχωρισμού της στήλης αξιολογήθηκε σύμφωνα με την τιμή συγκράτησης και το πλάτος κορυφής της χρωματογραφικής κορυφής
Ο τύπος υπολογισμού που εμπλέκεται στη χρωματογραφία
1. Αξία διατήρησης
Η τιμή συγκράτησης είναι μια παράμετρος που χρησιμοποιείται για να περιγράψει τον βαθμό στον οποίο ένα συστατικό δείγμα διατηρείται στη στήλη και χρησιμοποιείται ως δείκτης χρωματογραφικού χαρακτηρισμού.Η μέθοδος αναπαράστασής του είναι η εξής:
Χρόνος συγκράτησης tR
Ώρα θανάτουtM
Ρυθμίστε το χρόνο συγκράτησης tR'=tR-tM
(Συνολικός χρόνος που δαπανάται σε στατική φάση)
Όγκος κατακράτησης
VR=tR*F. (ανεξάρτητο από την ταχύτητα κινητής φάσης)
Νεκρός όγκος
VM=tM*Fc
(Ο χώρος που δεν καταλαμβάνεται από τη στατική φάση στη διαδρομή ροής από τον εγχυτήρα στον ανιχνευτή)
Προσαρμόστε τον όγκο διατήρησης VR'=t'R*Fc
2. Σχετική τιμή διατήρησης
Η σχετική τιμή συγκράτησης, γνωστή και ως συντελεστής διαχωρισμού, λόγος συντελεστή κατανομής ή συντελεστής σχετικής χωρητικότητας, είναι ο λόγος του προσαρμοσμένου χρόνου συγκράτησης (όγκος) του εξεταζόμενου στοιχείου προς τον προσαρμοσμένο χρόνο συγκράτησης (όγκος) του προτύπου υπό ορισμένες χρωματογραφικές συνθήκες.
Οι σχετικές τιμές συγκράτησης χρησιμοποιήθηκαν για την εξάλειψη της επίδρασης ορισμένων συνθηκών λειτουργίας, όπως ο ρυθμός ροής και η απώλεια σταθεροποιητικού, στις τιμές συγκράτησης.Το πρότυπο στη σχετική τιμή κατακράτησης μπορεί να είναι ένα συστατικό στο υπό δοκιμή δείγμα ή μια ένωση που προστίθεται τεχνητά.
3. Δείκτης διατήρησης
Ο δείκτης κατακράτησης είναι ο δείκτης κατακράτησης της ουσίας i που θα δοκιμαστεί σε σταθερό διάλυμα Χ. Δύο ν-αλάνια επιλέγονται ως ουσίες αναφοράς, η μία από τις οποίες έχει N αριθμό άνθρακα και η άλλη έχει N+n.Ο προσαρμοσμένος χρόνος κατακράτησης τους είναι t 'r (N) και t 'r (N+n), αντίστοιχα, έτσι ώστε ο προσαρμοσμένος χρόνος κατακράτησης t'r (i) της προς δοκιμή ουσίας i να βρίσκεται ακριβώς μεταξύ τους, δηλαδή, t 'r (Ν).
Ο δείκτης διατήρησης μπορεί να υπολογιστεί ως εξής.
4. Συντελεστής χωρητικότητας (k)
Σε κατάσταση ισορροπίας, ο λόγος της μάζας ενός συστατικού στη στατική φάση (ες) προς την κινητή φάση (m), που ονομάζεται συντελεστής χωρητικότητας.Ο τύπος έχει ως εξής:
5. Συντελεστής κατανομής (K) Σε κατάσταση ισορροπίας, ο λόγος της συγκέντρωσης ενός συστατικού στη στατική φάση (ες) προς την κινητή φάση (m), που ονομάζεται συντελεστής κατανομής.Ο τύπος έχει ως εξής
Η σχέση μεταξύ Κ και Κ:
Αντανακλά τον τύπο της στήλης και τις σημαντικές ιδιότητες της δομής του κόμβου
σύντομη περίληψη
Σχέση μεταξύ τιμής διατήρησης και συντελεστή χωρητικότητας και συντελεστή κατανομής:
Ο χρωματογραφικός διαχωρισμός βασίζεται στη διαφορά στην ικανότητα προσρόφησης ή διάλυσης κάθε συστατικού σε ένα σταθερό σχετικό δείγμα, η οποία μπορεί να εκφραστεί ποσοτικά με το μέγεθος της τιμής του συντελεστή κατανομής K (ή του συντελεστή χωρητικότητας k).
Τα συστατικά με ισχυρή ικανότητα προσρόφησης ή διάλυσης έχουν μεγάλο συντελεστή κατανομής (ή συντελεστή χωρητικότητας) και μεγάλο χρόνο διατήρησης.Αντίθετα, τα συστατικά με ασθενή προσρόφηση ή διαλυτότητα έχουν μικρό συντελεστή κατανομής και μικρό χρόνο κατακράτησης.
Βασική θεωρία της χρωματογραφίας
1. Θεωρία δίσκων
(1) Υποβολή -- θερμοδυναμική θεωρία
Ξεκίνησε με το μοντέλο της πλάκας πύργου που πρότειναν οι Martin και Synge.
Στήλη κλασματοποίησης: στο δίσκο για αρκετές φορές ισορροπίας αερίου-υγρού, ανάλογα με το σημείο βρασμού του διαφορετικού διαχωρισμού.
Στήλη: Τα εξαρτήματα εξισορροπούνται από πολλαπλά διαμερίσματα μεταξύ των δύο φάσεων και διαχωρίζονται σύμφωνα με διαφορετικούς συντελεστές κατανομής.
(2) Υπόθεση
(1) Υπάρχουν πολλοί δίσκοι στη στήλη και τα εξαρτήματα μπορούν γρήγορα να φτάσουν στην ισορροπία κατανομής εντός του διαστήματος του δίσκου (δηλαδή στο ύψος του δίσκου).
(2) Η κινητή φάση εισέρχεται στη στήλη, όχι συνεχώς αλλά παλλόμενη, δηλαδή κάθε δίοδος είναι ένας όγκος στήλης.
(3) Όταν το δείγμα προστέθηκε σε κάθε πλάκα στήλης, η διάχυση του δείγματος κατά μήκος του άξονα της στήλης θα μπορούσε να παραμεληθεί.
(4) Ο συντελεστής κατανομής είναι ίσος σε όλους τους δίσκους, ανεξάρτητα από την ποσότητα των εξαρτημάτων.Δηλαδή, ο συντελεστής κατανομής είναι σταθερός σε κάθε taban.
(3) Αρχή
Σχηματικό διάγραμμα θεωρίας δίσκων
Εάν ένα συστατικό μονάδας μάζας, δηλαδή m=1 (για παράδειγμα, 1mg ή 1μg), προστεθεί στον δίσκο Νο. 0, και μετά την ισορροπία κατανομής, γιατί k=1, δηλαδή ns=nm, nm=ns=0,5.
Όταν ένας όγκος πλάκας (lΔV) φέροντος αερίου εισέρχεται στην πλάκα 0 με τη μορφή παλμών, το φέρον αέριο που περιέχει το συστατικό nm στην αέρια φάση ωθείται στην πλάκα 1. Αυτή τη στιγμή, το συστατικό ns στην υγρή φάση της πλάκας 0 και το συστατικό nm στην αέρια φάση της πλάκας 1 θα ανακατανεμηθεί μεταξύ των δύο φάσεων.Επομένως, η συνολική ποσότητα των συστατικών που περιέχονται στην πλάκα 0 είναι 0,5, στην οποία η αέρια και η υγρή φάση είναι η καθεμία 0,25 και η συνολική ποσότητα που περιέχεται στην πλάκα 1 είναι επίσης 0,5.Οι αέριες και υγρές φάσεις ήταν επίσης 0,25.
Αυτή η διαδικασία επαναλαμβάνεται κάθε φορά που ένα νέο αέριο φορέα όγκου πλάκας παλμοποιείται στη στήλη (βλ. πίνακα παρακάτω).
(4)Χρωματογραφική εξίσωση καμπύλης εκροής
σ είναι η τυπική απόκλιση, είναι ο χρόνος κατακράτησης, C είναι η συγκέντρωση ανά πάσα στιγμή,
C, είναι η συγκέντρωση έγχυσης, δηλαδή η συνολική ποσότητα των συστατικών (περιοχή κορυφής Α).
(5) παράμετροι απόδοσης στήλης
Σε μια σταθερή tR, όσο μικρότερο είναι το W ή w 1/2 (δηλαδή, τόσο στενότερη κορυφή), τόσο μεγαλύτερος είναι ο αριθμός των θεωρητικών πλακών n, τόσο μικρότερο είναι το θεωρητικό ύψος της πλάκας και τόσο μεγαλύτερη είναι η απόδοση διαχωρισμού της στήλης.Το ίδιο ισχύει και για την αποτελεσματική θεωρία tray neff.Επομένως, ο θεωρητικός αριθμός δίσκων είναι ένας δείκτης για την αξιολόγηση της απόδοσης των στηλών.
(5)Χαρακτηριστικά και ελλείψεις
> Πλεονεκτήματα
Η θεωρία του δίσκου είναι ημι-εμπειρική και εξηγεί το σχήμα της καμπύλης εκροής
Εικονογραφούνται οι διαδικασίες διαχωρισμού και διαχωρισμού των εξαρτημάτων
Προτείνεται ένας δείκτης για την αξιολόγηση της αποτελεσματικότητας της στήλης
> Περιορισμοί
Τα συστατικά δεν μπορούν πραγματικά να φτάσουν στην ισορροπία κατανομής στις δύο φάσεις:
Η διαμήκης διάχυση των στοιχείων στη στήλη δεν μπορεί να αγνοηθεί:
Η επίδραση διαφόρων κινητικών παραγόντων στη διαδικασία μεταφοράς μάζας δεν ελήφθη υπόψη.
Η σχέση μεταξύ του φαινομένου της στήλης και της ταχύτητας ροής της κινητής φάσης δεν μπορεί να εξηγηθεί:
Δεν είναι σαφές ποιοι κύριοι παράγοντες επηρεάζουν το φαινόμενο της στήλης
Αυτά τα προβλήματα επιλύονται ικανοποιητικά στη θεωρία ποσοστού.
2. Θεωρία ποσοστού
Το 1956, ο Ολλανδός μελετητής VanDeemter et al.απορρόφησε την έννοια της θεωρίας δίσκων και συνδύασε τους κινητικούς παράγοντες που επηρεάζουν το ύψος του δίσκου, πρότεινε την κινητική θεωρία της χρωματογραφικής διεργασίας - θεωρία ρυθμού και εξήγαγε την εξίσωση VanDeemter.Θεωρεί τη χρωματογραφική διαδικασία ως μια δυναμική διαδικασία μη ισορροπίας και μελετά την επίδραση των κινητικών παραγόντων στη διεύρυνση της κορυφής (δηλαδή, το φαινόμενο στήλης).
Αργότερα, οι Giddings and Snyder et al.πρότεινε την εξίσωση ρυθμού υγρής χρωματογραφίας (συγκεκριμένα εξίσωση Giddings) με βάση την εξίσωση VanDeemter (που αργότερα ονομάστηκε εξίσωση ρυθμού αέριας χρωματογραφίας) και σύμφωνα με τη διαφορά ιδιοτήτων μεταξύ υγρού και αερίου.
(1) Εξίσωση Van Deemter
Όπου: H: είναι το ύψος του πίνακα
Α: συντελεστής όρου διάχυσης δίνων
Β: συντελεστής όρου μοριακής διάχυσης
C: συντελεστής του όρου αντίστασης μεταφοράς μάζας
(2) Εξίσωση Giddings
Ποσοτική και ποιοτική ανάλυση
(1) Ποιοτική ανάλυση
Η ποιοτική χρωματογραφική ανάλυση είναι ο προσδιορισμός των ενώσεων που αντιπροσωπεύονται από κάθε χρωματογραφική κορυφή.Δεδομένου ότι διάφορες ουσίες έχουν καθορισμένες τιμές κατακράτησης υπό ορισμένες χρωματογραφικές συνθήκες, η τιμή κατακράτησης μπορεί να χρησιμοποιηθεί ως ποιοτικός δείκτης.Διάφορες χρωματογραφικές ποιοτικές μέθοδοι βασίζονται επί του παρόντος σε τιμές κατακράτησης.
Ωστόσο, διαφορετικές ουσίες μπορεί να έχουν παρόμοιες ή ταυτόσημες τιμές κατακράτησης υπό τις ίδιες χρωματογραφικές συνθήκες, δηλαδή οι τιμές κατακράτησης δεν είναι αποκλειστικές.Έτσι είναι δύσκολο να χαρακτηριστεί ένα εντελώς άγνωστο δείγμα με βάση μόνο τις τιμές κατακράτησης.Εάν με βάση την κατανόηση της πηγής, της φύσης και του σκοπού του δείγματος, μπορεί να γίνει μια προκαταρκτική κρίση για τη σύνθεση του δείγματος και μπορούν να χρησιμοποιηθούν οι ακόλουθες μέθοδοι για τον προσδιορισμό της ένωσης που αντιπροσωπεύεται από τη χρωματογραφική κορυφή.
1. Ποιοτικός έλεγχος με χρήση καθαρών ουσιών
Κάτω από ορισμένες χρωματογραφικές συνθήκες, ένας άγνωστος έχει μόνο έναν καθορισμένο χρόνο κατακράτησης.Επομένως, το άγνωστο μπορεί να προσδιοριστεί ποιοτικά συγκρίνοντας τον χρόνο κατακράτησης της γνωστής καθαρής ουσίας υπό τις ίδιες χρωματογραφικές συνθήκες με τον χρόνο κατακράτησης της άγνωστης ουσίας.Εάν τα δύο είναι τα ίδια, η άγνωστη ουσία μπορεί να είναι μια γνωστή καθαρή ουσία.Διαφορετικά, το άγνωστο δεν είναι η καθαρή ουσία.
Η μέθοδος ελέγχου καθαρής ουσίας ισχύει μόνο για την άγνωστη ουσία της οποίας η σύνθεση είναι γνωστή, της οποίας η σύνθεση είναι σχετικά απλή και της οποίας η καθαρή ουσία είναι γνωστή.
2. Μέθοδος σχετικής τιμής διατήρησης
Η σχετική τιμή συγκράτησης α, αναφέρεται στην προσαρμογή μεταξύ του συστατικού i και των υλικών αναφοράς Αναλογία τιμών συγκράτησης:
Αλλάζει μόνο με την αλλαγή του σταθεροποιητικού και της θερμοκρασίας της στήλης, και δεν έχει καμία σχέση με άλλες συνθήκες λειτουργίας.
Σε μια ορισμένη θερμοκρασία σταθερής φάσης και στήλης, οι προσαρμοσμένες τιμές κατακράτησης του συστατικού i και της ουσίας αναφοράς s μετρώνται αντίστοιχα και στη συνέχεια υπολογίζονται σύμφωνα με τον παραπάνω τύπο.Οι ληφθείσες σχετικές τιμές κατακράτησης μπορούν να συγκριθούν ποιοτικά με τις αντίστοιχες τιμές της βιβλιογραφίας.
3, προσθέτοντας γνωστές ουσίες για την αύξηση της μεθόδου του ύψους κορυφής
Όταν υπάρχουν πολλά συστατικά στο άγνωστο δείγμα, οι λαμβανόμενες χρωματογραφικές κορυφές είναι πολύ πυκνές για να αναγνωρίζονται εύκολα με την παραπάνω μέθοδο ή όταν το άγνωστο δείγμα χρησιμοποιείται μόνο για την ανάλυση του καθορισμένου είδους.
"Πρώτα γίνεται ένα χρωματογράφημα ενός άγνωστου δείγματος και στη συνέχεια λαμβάνεται ένα περαιτέρω χρωματογράφημα με την προσθήκη μιας γνωστής ουσίας στο άγνωστο δείγμα."Συστατικά με αυξημένα ύψη κορυφής μπορούν να είναι γνωστά για τέτοιες ουσίες.
4. Διατηρήστε την ποιοτική μέθοδο του δείκτη
Ο δείκτης κατακράτησης αντιπροσωπεύει τη συμπεριφορά κατακράτησης ουσιών στα σταθεροποιητικά και είναι επί του παρόντος ο πιο ευρέως χρησιμοποιούμενος και διεθνώς αναγνωρισμένος ποιοτικός δείκτης στο GC.Έχει τα πλεονεκτήματα της καλής αναπαραγωγιμότητας, του ομοιόμορφου προτύπου και του μικρού συντελεστή θερμοκρασίας.
Ο δείκτης συγκράτησης σχετίζεται μόνο με τις ιδιότητες της στατικής φάσης και τη θερμοκρασία της στήλης, αλλά όχι με άλλες πειραματικές συνθήκες.Η ακρίβεια και η αναπαραγωγιμότητά του είναι εξαιρετική.Εφόσον η θερμοκρασία της στήλης είναι ίδια με εκείνη της στατικής φάσης, η βιβλιογραφική τιμή μπορεί να εφαρμοστεί για αναγνώριση και δεν είναι απαραίτητο να χρησιμοποιηθεί το καθαρό υλικό για σύγκριση.
(2)Ποσοτική ανάλυση
Βάση για χρωματογραφική ποσοτικοποίηση:
Το καθήκον της ποσοτικής ανάλυσης είναι να βρει τα εκατό από τα συστατικά στο μικτό δείγμα
Κλασματικό περιεχόμενο.Η χρωματογραφική ποσοτικοποίηση βασίστηκε στα εξής: όταν οι συνθήκες λειτουργίας ήταν συνεπείς, ήταν
Η μάζα (ή η συγκέντρωση) του μετρούμενου συστατικού προσδιορίζεται από το σήμα απόκρισης που δίνεται από τον ανιχνευτή
Είναι αναλογικό.Και συγκεκριμένα:
Βάση για χρωματογραφική ποσοτικοποίηση:
Το καθήκον της ποσοτικής ανάλυσης είναι να βρει τα εκατό από τα συστατικά στο μικτό δείγμα
Κλασματικό περιεχόμενο.Η χρωματογραφική ποσοτικοποίηση βασίστηκε στα εξής: όταν οι συνθήκες λειτουργίας ήταν συνεπείς, ήταν
Η μάζα (ή η συγκέντρωση) του μετρούμενου συστατικού προσδιορίζεται από το σήμα απόκρισης που δίνεται από τον ανιχνευτή
Είναι αναλογικό.Και συγκεκριμένα:
1. Μέθοδος μέτρησης επιφάνειας κορυφής
Το εμβαδόν κορυφής είναι τα βασικά ποσοτικά δεδομένα που παρέχονται από τα χρωματογραφήματα και η ακρίβεια της μέτρησης του εμβαδού κορυφής επηρεάζει άμεσα τα ποσοτικά αποτελέσματα.Χρησιμοποιήθηκαν διαφορετικές μέθοδοι μέτρησης για χρωματογραφικές κορυφές με διαφορετικά σχήματα κορυφών.
Είναι δύσκολο να βρεθεί η ακριβής αξία του χειμώνα σε ποσοτική ανάλυση:
Αφενός λόγω της δυσκολίας ακριβούς μέτρησης του απόλυτου όγκου έγχυσης: αφετέρου
Η περιοχή κορυφής εξαρτάται από τις χρωματογραφικές συνθήκες και η χρωματογραφική λωρίδα θα πρέπει να διατηρείται όταν μετράται η τιμή
Δεν είναι ούτε δυνατό ούτε βολικό να κάνουμε το ίδιο πράγμα.Και ακόμα κι αν μπορείτε να το κάνετε σωστά
Η ακριβής τιμή, επίσης επειδή δεν υπάρχει ενιαίο πρότυπο και δεν μπορεί να εφαρμοστεί άμεσα.
2.Ποσοτικός συντελεστής διόρθωσης
Ορισμός ποσοτικού συντελεστή διόρθωσης: ποσότητα εξαρτημάτων που εισέρχονται στον ανιχνευτή (m)
Ο λόγος του εμβαδού της χρωματογραφικής κορυφής (A) ή του ύψους κορυφής () είναι μια σταθερά αναλογικότητας (,
Η σταθερά αναλογικότητας ονομάζεται απόλυτος συντελεστής διόρθωσης για τη συνιστώσα.
Είναι δύσκολο να βρεθεί η ακριβής αξία του χειμώνα σε ποσοτική ανάλυση:
Αφενός λόγω της δυσκολίας ακριβούς μέτρησης του απόλυτου όγκου έγχυσης: αφετέρου
Η περιοχή κορυφής εξαρτάται από τις χρωματογραφικές συνθήκες και η χρωματογραφική λωρίδα θα πρέπει να διατηρείται όταν μετράται η τιμή
Δεν είναι ούτε δυνατό ούτε βολικό να κάνουμε το ίδιο πράγμα.Και ακόμα κι αν μπορείτε να το κάνετε σωστά
Η ακριβής τιμή, επίσης επειδή δεν υπάρχει ενιαίο πρότυπο και δεν μπορεί να εφαρμοστεί άμεσα.
Δηλαδή, ο σχετικός συντελεστής διόρθωσης «ενός συστατικού είναι το συστατικό και το υλικό αναφοράς s
Η αναλογία των απόλυτων συντελεστών διόρθωσης.
Μπορεί να φανεί ότι ο σχετικός συντελεστής διόρθωσης είναι όταν η ποιότητα του εξαρτήματος έναντι του προτύπου.
Όταν η ουσία s είναι ίση, το εμβαδόν κορυφής του υλικού αναφοράς είναι το εμβαδόν κορυφής του συστατικού
Πολλαπλούς.Αν κάποιο συστατικό έχει μάζα m και εμβαδόν κορυφής Α, τότε ο αριθμός f'A
Οι τιμές είναι ίσες με το εμβαδόν κορυφής του υλικού αναφοράς με μάζα του.Με άλλα λόγια,
Μέσω του σχετικού συντελεστή διόρθωσης, οι περιοχές κορυφής κάθε συστατικού μπορούν να διαχωριστούν
Μετατρέπεται στο εμβαδόν κορυφής του υλικού αναφοράς ίσο με τη μάζα του και στη συνέχεια η αναλογία
Το πρότυπο είναι ενιαίο.Αυτή είναι λοιπόν η κανονικοποιημένη μέθοδος για να υπολογίσετε το ποσοστό κάθε συστατικού
Η βάση της ποσότητας.
Μέθοδος λήψης σχετικού συντελεστή διόρθωσης: οι τιμές του σχετικού συντελεστή διόρθωσης συγκρίθηκαν μόνο με το είναι
Η μέτρηση σχετίζεται με το πρότυπο και τον τύπο του ανιχνευτή, αλλά με την ταινία λειτουργίας
Δεν πειράζει.Επομένως, οι τιμές μπορούν να ανακτηθούν από αναφορές στη βιβλιογραφία.Αν το κείμενο
Εάν δεν μπορείτε να βρείτε την επιθυμητή τιμή στην προσφορά, μπορείτε επίσης να την προσδιορίσετε μόνοι σας.Μέθοδος προσδιορισμού
Μέθοδος: Ορισμένη ποσότητα της μετρούμενης ουσίας δέκα επιλεγμένο υλικό αναφοράς → μετατρέπεται σε συγκεκριμένη συγκέντρωση
Μετρήθηκαν οι χρωματογραφικές περιοχές κορυφής Α και As των δύο συστατικών.
Αυτή είναι η φόρμουλα.
3. Ποσοτική μέθοδος υπολογισμού
(1) Μέθοδος κανονικοποίησης περιοχής
Το άθροισμα της περιεκτικότητας όλων των κλασμάτων χωρίς κορυφές υπολογίστηκε ως 100% για ποσοτικοποίηση
Η μέθοδος ονομάζεται κανονικοποίηση.Ο τύπος υπολογισμού του έχει ως εξής:
Όπου P,% είναι η ποσοστιαία περιεκτικότητα των ελεγχόμενων συστατικών.A1, A2... Το A n είναι συνιστώσα 1. Το εμβαδόν κορυφής 1~n;f'1, f'2... f'n είναι ο σχετικός συντελεστής διόρθωσης για τα στοιχεία 1 έως n.
(2) εξωτερικό πρότυπο μέθοδο
Η μέθοδος ποσοτικής σύγκρισης μεταξύ του σήματος απόκρισης του προς δοκιμή στοιχείου στο δείγμα και του καθαρού συστατικού που θα ελεγχθεί ως μάρτυρας.
(3) Μέθοδος εσωτερικού προτύπου
Η λεγόμενη μέθοδος εσωτερικού προτύπου είναι μια μέθοδος κατά την οποία μια ορισμένη ποσότητα καθαρής ουσίας προστίθεται στο πρότυπο διάλυμα της υπό δοκιμή ουσίας και στο διάλυμα δείγματος ως εσωτερικό πρότυπο, και στη συνέχεια αναλύεται και προσδιορίζεται.
(3) τυπική μέθοδος προσθήκης
Η τυπική μέθοδος προσθήκης, γνωστή και ως μέθοδος εσωτερικής προσθήκης, είναι η προσθήκη ορισμένης ποσότητας (△C)
Η αναφορά της ελεγχόμενης ουσίας προστέθηκε στο προς δοκιμή διάλυμα δείγματος και η δοκιμή προστέθηκε στον προσδιορισμό
Η κορυφή του διαλύματος δείγματος μετά την ουσία ήταν υψηλότερη από αυτή του αρχικού διαλύματος δείγματος
Η αύξηση του εμβαδού (△A) χρησιμοποιήθηκε για τον υπολογισμό της συγκέντρωσης της ουσίας στο διάλυμα του δείγματος
Περιεχόμενο (Cx)
Όπου Ax είναι το εμβαδόν κορυφής της ουσίας που θα μετρηθεί στο αρχικό δείγμα.
Ώρα δημοσίευσης: Μαρ-27-2023